上海植物生理生態(tài)研究所：“用于生產(chǎn)L-2-氨基丁酸載體、工程菌株及方法”專利技術(shù)

一、項(xiàng)目簡(jiǎn)介

本技術(shù)屬于微生物工業(yè)發(fā)酵領(lǐng)域。本發(fā)明用于發(fā)酵法或酶法生產(chǎn)藥物中間體 L-2-氨基丁酸。L-2-氨基丁酸(L(+)-2-Aminobutyric acid)，是一種非天然的手性α-氨基酸，分子式為C 4 H 9 NO 2，主要用于合成治療局限性及繼發(fā)性全身性癲癇的藥物（如左乙拉西坦），同時(shí)也是合成抑菌抗結(jié)核藥乙胺丁醇的關(guān)鍵手性前體。 轉(zhuǎn)氨酶法是目前廣泛應(yīng)用的生產(chǎn)L-2-氨基丁酸的方法。早期采用酮酸和谷氨酸為底物，在氨基酸轉(zhuǎn)氨酶的作用下生成L-2-氨基丁酸，該法收率較低；后采用L-蘇氨酸為原料，采用三酶體系制備L-2-氨基丁酸，該法產(chǎn)率低且有副產(chǎn)物影響產(chǎn)品的純化；氨基酸氧化酶法是使用D-氨基酸氧化酶在金屬催化劑的作用下制備L-2-氨基丁酸，該法成本高，不適合大規(guī)模工業(yè)應(yīng)用。 此外還有脫氫酶法、氨基酰化酶法等，但是存在生產(chǎn)成本過(guò)高以及酶活受到底物抑制的問(wèn)題，因此工業(yè)應(yīng)用效果不佳。

本發(fā)明提供了L-2-氨基丁酸的大腸桿菌高產(chǎn)菌株，以葡萄糖為原料，通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)本發(fā)明構(gòu)建的基因工程菌株而得到L-2-氨基丁酸。其優(yōu)點(diǎn)是成本低，產(chǎn)物濃度高，沒有副產(chǎn)物影響，產(chǎn)物易于純化。關(guān)鍵技術(shù)指標(biāo)：最大L-2-氨基丁酸產(chǎn)量達(dá)到20g/L發(fā)酵液，光學(xué)純ee為99%。

二、專利摘要

本發(fā)明涉及用于生產(chǎn)L-2-氨基丁酸的載體、工程菌株及方法。具體地，本發(fā)明涉及的重組載體包含蘇氨酸脫氨酶編碼基因和L-氨基酸脫氫酶編碼基因以及合適的載體片段；本發(fā)明的基因工程菌株，是使用本發(fā)明提供的重組載體轉(zhuǎn)化宿主菌得到；生產(chǎn)L-2-氨基丁酸的方法是通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)本發(fā)明提供的基因工程菌而獲得的。本發(fā)明以葡萄糖為原料，通過(guò)發(fā)酵培養(yǎng)本發(fā)明構(gòu)建的基因工程菌株而得到L-2-氨基丁酸。本發(fā)明方法成本低，產(chǎn)物濃度高，沒有副產(chǎn)物影響，產(chǎn)物易于純化，非常適于工業(yè)應(yīng)用。

三、專利狀態(tài)

本技術(shù)已遞交中國(guó)專利申請(qǐng)，申請(qǐng)?zhí)枺?/span>201210015310.0；目前已獲授權(quán)。

四、合作方式

轉(zhuǎn)讓或許可。

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